加入收藏
百奥莱博公司客服电话百奥莱博QQ百奥莱博QQ百奥莱博QQ
百奥莱博公司微信服务号

产品目录

高通量96孔板DNA产物纯化回收试剂盒图片
产品货号:
WH0157
中文名称:
高通量96孔板DNA产物纯化回收试剂盒
英文名称:
96wells DNA Product Purification and Recovery Kit
产品规格:
4×96孔|24×96孔板
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒通过96孔吸附板特异性地结合酶切、PCR、测序等反应溶液中的DNA片段,可除去蛋白质、有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。纯化的DNA可适用于限制性酶切、测序、文库筛选,连接和转化等分子生物学实验。

产品特点:
·回收100bp-10kb DNA片段,回收率可达80%以上。
·每孔最多可吸附的DNA量为5μg。
·纯度高:可直接用于下游实验。

提取流程:
高通量96孔板DNA产物纯化回收试剂盒流程图

提取实例:
高通量96孔板DNA产物纯化回收试剂盒提取实例
使用本试剂盒纯化900bp,3500bp,4500bp片段。50μl洗脱,3μl上样,琼脂糖凝胶浓度为1%,6V/cm电泳20min,1、2、3为本试剂盒纯化,4是使用某进口品牌试剂盒纯化。

组分4板24板
平衡液BL240ml3×500ml
结合液PB240ml3×500ml
漂洗液PW3×50ml2×500ml
洗脱缓冲液TB60ml240ml
半裙边96孔吸附板CB24板24板
96孔深孔板8板48板
250ml试剂瓶-1个
封口膜4张24张

储存条件:室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。

注意事项:请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1.本试剂盒适用于无选择性的回收溶液中所有DNA片段(可去除30 bp以下的小片段),如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,请选择胶回收试剂盒。
2.回收得率与DNA初始量及洗脱体积有关。DNA初始量越低,洗脱体积越少,回收得率越低。洗脱体积最好不要少于每孔60μl。
3.每次使用前取50ml漂洗液PW并加入200 ml无水乙醇摇匀后使用。
4.使用前请先检查平衡液BL是否出现浑浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。实验前使用平衡液处理吸附柱,可以最大限度激活硅基质膜,提高得率。
5.实验前使用平衡液BL处理吸附板,可以最大限度激活硅基质膜,提高得率。
6.用平衡液BL处理过的板子最好当天使用,放置时间过长会影响效果。

操作步骤:(离心法)
1.板平衡步骤:将96孔吸附板CB2叠放在96孔深孔板上,每孔中加入500 μl的平衡液BL,3,600rpm(~2,130×g)离心3 min,弃废液,将吸附板重新放回深孔板上。(请使用当天处理过的吸附板)
2.估计PCR反应液或酶切反应液的体积,向其中加入3倍体积的结合液PB。
  举例:如PCR反应体系为100 μl (不包括石蜡油体积),则加入300 μl结合液PB。如果混合液体积超过PCR管的体积,可将PCR反应液或者酶切反应液转移到96孔深孔板中,与结合液PB进行混合再进行下游实验。
3.充分混匀后转移所有上述混合液到第一步平衡过的96孔吸附板CB2中。室温放置2 min,3,600rpm(~2,130×g)离心5 min,弃废液,将吸附板重新放回同一深孔板中。
  注意:单孔吸附柱容量为700 μl,若样品体积大于700 μl可分批加入离心。
4.向96孔吸附板CB2每孔中加入700 μl漂洗液PW (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),3,600rpm(~2,130×g)离心3 min,弃废液,将吸附板重新放回同一深孔板中。
5.重复操作步骤4。
6.3,600rpm(~2,130×g)离心10min,目的是将吸附板中残余的漂洗液去除。
  注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
7.将96孔吸附板CB2置于一个新的96孔深孔板中,向吸附板各孔膜的中间部位悬空滴加80-100 μl ddH2O(pH≥7.5)或洗脱缓冲液TB,室温放置5 min,3,600rpm (~2,130×g)离心10min收集DNA溶液。
  注意:通常80 μl的洗脱液平均洗脱得到50 μl的DNA产物。为提高得率,可以增加洗脱液体积。此外,若用ddH2O洗脱应保证其pH值在7.0-8.5范围内。

操作步骤:(负压法)
1.正确连接负压装置,将96孔吸附板CB2置于负压装置上;向96孔吸附板CB2每孔中添加200 μl平衡液BL,开启并调节负压,吸尽板中溶液。
2.在PCR、酶切、酶标或测序反应液中,加3倍体积的PB;混合均匀后转移到平衡过的96孔吸附板CB2中,室温放置2 min,开启并调节负压吸尽板中溶液。
3.向96孔吸附板CB2中每孔添加200 μl漂洗液PW,吸尽板中溶液。
4.重复第3步骤。
5.以最大负压将96孔吸附板CB2抽吸10min。
  注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
6.导流管朝下将96孔吸附板CB2于吸水纸上用力拍击6次。
7.将96孔吸附板CB2置于96孔深孔板上,在膜正中央加80-100 μl ddH2O(pH≥7.5)或洗脱缓冲液TB,室温静置5 min。3,600rpm离心10min收集DNA溶液。
8.在该96孔深孔板上覆盖一张新的封口膜,DNA溶液保存于-20℃备用。

DNA浓度及纯度检测:
1.DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
2.DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。
3.OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O,比值会偏低,但并不表示纯度低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值。
相关搜索:高通量96孔板DNA产物纯化回收试剂盒96wells DNA Product Purification and Recovery Kit
首页 |  关于我们 |  联系我们 |  在线咨询 |  网站地图
北京百奥莱博科技有限公司 京ICP备14007103号-3