产品货号：
WH0157
中文名称：
高通量96孔板DNA产物纯化回收试剂盒
英文名称：
96wells DNA Product Purification and Recovery Kit
产品规格：
4×96孔|24×96孔
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒采用独特的吸附柱纯化酶切、PCR等反应溶液中的DNA片段。可除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。
- 快速：整个操作过程只需几十分钟，有效节省时间。
- 高效：独特的吸附板和精心配制的缓冲液保证每次有效回收到高纯度的目的DNA。
- 回收率高：回收100bp～3.5kb DNA片段，回收率可达80%以上。
- 高通量处理：每孔每次可吸附的DNA量为5μg。
| 组分 | 4×96孔 | 24×96孔 |
| 平衡液BL | 240mL | 3×500mL |
| 结合液PB | 240mL | 3×500mL |
| 漂洗液PW | 3×50mL | 2×500mL |
| 洗脱缓冲液TB | 60mL | 240mL |
| 半裙边96孔吸附板CB2 | 4板 | 24板 |
| 96孔深孔板 | 8板 | 48板 |
| 250mL试剂瓶 | - | 1个 |
| 封口膜 | 4张 | 24张 |
保存：室温，有效期1年。
- 更长时间的保存可将本试剂盒置于2～8℃。2～8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。
- 本试剂盒适用于无选择性的回收溶液中所有DNA片段（可去除30bp以下的小片段），如需选择性回收特定片段，同时去除其他不同大小片段，请选择胶回收试剂盒。
- 回收得率与DNA初始量及洗脱体积有关。DNA初始量越低，洗脱体积越少，回收得率越低。洗脱体积最好不要少于每孔60μL。
- 每次使用前取50mL漂洗液PW并加入200mL无水乙醇摇匀后使用。
- 使用前请先检查平衡液BL是否出现浑浊，如有混浊现象，可在37℃水浴中加热10min，即可恢复澄清。实验前使用平衡液处理吸附柱，可以有效激活硅基质膜，提高得率。
- 实验前使用平衡液BL处理吸附板，可以有效激活硅基质膜，提高得率。
- 用平衡液BL处理过的板子最好当天使用，放置时间过长会影响效果。
一、离心法
- 板平衡步骤：将96孔吸附板CB2叠放在96孔深孔板上，每孔中加入500μL的平衡液BL，
3600rpm (~2130×g)离心3min，弃废液，将吸附板重新放回深孔板上（请使用当天处理过的吸附板）。 - 估计PCR反应液或酶切反应液的体积，向其中加入3倍体积的结合液PB。
- 举例：如PCR反应体系为100μL（不包括石蜡油体积），则加入300μL结合液PB。如果混合液体积超过PCR管的体积，可将PCR反应液或者酶切反应液转移到96孔深孔板中，与结合液PB进行混合再进行下游实验。
- 充分混匀后转移所有上述混合液到第一步平衡过的96孔吸附板CB2中。室温放置2min，3600rpm (~2130×g)离心5min，弃废液，将吸附板重新放回同一深孔板中。
- 单孔吸附柱容量为700μL，若样品体积大于700μL可分批加入离心。
- 向96孔吸附板CB2每孔中加入700μL漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），3600rpm (~2130×g)离心3min，弃废液，将吸附板重新放回同一深孔板中。
- 重复操作步骤4。
- 3600rpm (~2130×g)离心10min，目的是将吸附板中残余的漂洗液去除。
- 漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
- 将96孔吸附板CB2置于一个新的96孔深孔板中，向吸附板各孔膜的中间部位悬空滴加80～100μL ddH2O（pH≥7.5）或洗脱缓冲液TB，室温放置5min，3600rpm (~2130×g)离心10min收集DNA溶液。
- 通常80μL的洗脱液平均洗脱得到50μL的DNA产物。为提高得率，可以增加洗脱液体积。此外，若用ddH2O洗脱应保证其pH值在7.0～8.5范围内。
二、负压法
- 正确连接负压装置，将96孔吸附板CB2置于负压装置上；向96孔吸附板CB2每孔中添加200μL平衡液BL，开启并调节负压，吸尽板中溶液。
- 在PCR、酶切、酶标或测序反应液中，加3倍体积的结合液PB；混合均匀后转移到平衡过的96孔吸附板CB2中，室温放置2min，开启并调节负压吸尽板中溶液。
- 向96孔吸附板CB2中每孔添加200μL漂洗液PW，吸尽板中溶液。
- 重复第3步骤。
- 以最大负压将96孔吸附板CB2抽吸10min。
- 漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
- 导流管朝下将96孔吸附板CB2于吸水纸上用力拍击6次。
- 将96孔吸附板CB2置于96孔深孔板上，在膜正中央加80～100μL ddH2O（pH≥7.5）或洗脱缓冲液TB，室温静置5min。3600rpm离心10min收集DNA溶液。
- 在该96孔深孔板上覆盖一张新的封口膜，DNA溶液保存于-20℃备用。
使用本试剂盒纯化900bp，3500bp，4500bp片段。50μL洗脱，3μL上样，琼脂糖凝胶浓度为1%，6V/cm电泳20min，1、2、3为本试剂盒纯化，4是使用某进口品牌试剂盒纯化。
DNA浓度及纯度检测：
- DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
- DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50μg/mL双链DNA、40μg/mL单链DNA。
- OD260/OD280比值应为1.7～1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O，比值会偏低，但并不表示纯度低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值。
相关搜索：高通量96孔板DNA产物纯化回收试剂盒，DNA产物纯化，酶切产物纯化，PCR扩增产物纯化，连接产物纯化，96wells DNA Product Purification and Recovery Kit